Formatos Disponibles:
- RP173: Anticuerpo concentrado para su uso con el Sistema de Detección de Dos Pasos PolyVue™ Plus de Diagnostic BioSystems.
- PDR173: Anticuerpo listo para usar con el Sistema de Detección de Dos Pasos PolyVue™ Plus de Diagnostic BioSystems.
- PDR173-HL: Anticuerpo listo para usar en frascos etiquetados con RFID para su uso en el Sistema de Tinción HighLighter de Diagnostic BioSystems.
Ficha Técnica: DS-0630-D Fecha de Efectividad: 18/12/2023
Inmunógeno: Fragmento recombinante correspondiente a una región dentro de los aminoácidos 322 y 552 de SMAD4.
Especie: Conejo Diluyente Primario del Anticuerpo: K004
Uso Previsto: Para uso en diagnóstico in vitro. Este producto está destinado para inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejidos fijados con formol, embebidos en parafina, normal y neoplásicos para ser visualizados bajo un microscopio de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe estar acompañada por estudios biológicos adecuados con los controles apropiados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas relevantes deben ser utilizadas por una persona calificada al evaluar e interpretar los resultados.
Resumen y Explicación: Los SMADs son miembros de la familia de moléculas relacionadas con MAD. Estas proteínas actúan como componentes intracelulares en las vías de señalización de los receptores de serina/treonina cinasas de la familia TGFβ, mediando la transcripción de genes de respuesta al crecimiento. Las alteraciones en el gen SMAD4 se han descrito principalmente en cáncer de páncreas (ductal adenocarcinoma), así como en otros tipos de cáncer como colorrectal, gástrico, de mama, de pulmón y de cabeza y cuello, entre otros. La pérdida de expresión de SMAD4 en tumores se ha relacionado con una respuesta reducida a la quimioterapia adyuvante.
Formato: Fracción de inmunoglobulina purificada de suero de conejo conteniendo azida sódica como conservante.
Principios del Procedimiento: La detección de antígenos por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos etapas que implica primero la unión de un anticuerpo primario contra el antígeno de interés y, segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ, usando técnicas manuales o mediante el Sistema de Tinción de Diagnostic BioSystems Automated Montage 360™.
Dilución del Anticuerpo Primario: Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems han sido optimizados para ser utilizados con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems y no requieren dilución adicional. La dilución adicional puede resultar en una pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar cualquier cambio.
Materiales Necesarios, Pero No Suministrados: Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHQ no se proporcionan. Reactivos de pretratamiento, sistemas de detección, reactivos de control y otros reactivos auxiliares están disponibles en Diagnostic BioSystems. Por favor diríjase a la página web de Diagnostic BioSystems, www.dbiosys.com.
Almacenamiento y Manipulación: Almacenar a 2-8 °C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad impresa en el vial. No use el producto después de la fecha de caducidad. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas a las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben usarse de inmediato. Las porciones no utilizadas de preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día.
Recogida y Preparación de Muestras: Los tejidos fijados en formalina al 10% son adecuados para su uso antes de la inclusión en parafina. Consultar las referencias (Kiernan, 1981: Sheehan y Hrapchak, 1980) para más detalles sobre la preparación de muestras.
Precauciones: Este anticuerpo contiene menos del 0,1% de azida sódica. Las concentraciones de menos de 0,1% no son materiales peligrosos según las normativas. La azida de sodio (NaN3) usada como conservante es tóxica si se ingiere. El azida de sodio puede reaccionar con las tuberías de plomo y cobre para formar azidas metálicas altamente explosivas. Tras la eliminación, lavar con grandes cantidades de agua para evitar la acumulación de azida en las cañerías.
Parámetros:
- Control Positivo: Colon Ca, Páncreas Ca
- Dilución del Concentrado: 1:50 – 1:200
- El Pretratamiento: EDTA Buffer pH 8.0 (Manual/Montage)
- Incubación Tiempo & Temperatura: 30 min @ RT
- Sistema de Detección: PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de Dos Pasos o Montage 360 System o Highlighter core kit for Highlighter Staining System
- Tipo de Tejido: FFPE
Control de Calidad: Consulte las Normas de Calidad del CLSI para el Diseño e Implementación de ensayos de inmunohistoquímica; Pauta aprobada Segunda edición (E / LA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU. (www.clsi.org). 2011.
Solución de Problemas: Contacto con el soporte técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2, techsupport@dbiosys.com o con su Distribuidor local para informar coloración inusual.
Localización Celular: Nuclear/Citoplasma
Limitaciones del Procedimiento: La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica ambos métodos de detección histológicos e inmunológicos. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmuno-tinción también puede causar resultados inconsistentes.
Referencias:
- Shi et al. Metabolic tumor burden is associated with major oncogenomic alterations and serum tumor markers in patients with resected pancreatic cancer. Cancer Lett 360:227-33 (2015). IHC; Human
- Shi,Y. et al. A structural basis for mutational inactivation of the tumor suppressor Smad4. Nature. 1997;388:87–93. The first crystal structure of a Smad domain, the Smad4 MH2.
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