CD4 Células endoteliales Anticuerpo monoclonal de ratón

Anticuerpo Monoclonal de Ratón Mob119 Mob119-05 PDM093

Número de documento: DS-0085-A Fecha de entrada en vigor: 12/01/2014

Inmunógeno: Péptido sintético correspondiente a la dominio externo de la Molécula CD4. Clon: 1F6 Especie: Ratón Isotipo: IgG1 Primaria Diluyente Anticuerpo: K004

La concentración de Ig específica del lote disponible bajo petición.

Catálogo

• Mob119: 1 ml de anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos
• Mob119-05: 0,5 ml de anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos
• PDM093: 6 ml de anticuerpo listo para usar para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos

Uso previsto Para uso diagnóstico in vitro. Este producto está destinado a la inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejido normal y neoplásico fijado, incrustado en parafina, para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de estudios histológicos con los controles adecuados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizadas por una(s) persona(s) calificada(s) al evaluar e interpretar los resultados.

Resumen y explicación Este anticuerpo reacciona específicamente con las células CD4. CD4 es una glicoproteína transmembrana de cadena única con un peso molecular de 59 kDa. El antígeno CD4 se encuentra en una subpoblación de células T (ayudante/inductor) y también en timocitos y monocitos.

Formato Este producto se suministra como un sobrenadante de cultivo de tejido y contiene azida sódica como conservante.

Principios de los Procedimientos La detección de antígeno por Immunohistochemistry (IHC) es un proceso de dos etapas que implica en primer lugar, la unión de un anticuerpo primario al antígeno de interés, y en segundo, la detección del anticuerpo enlazado a un complejo enzimático. El anticuerpo primario puede ser usado con IHC utilizando técnicas manuales o automatizadas usando Diagnostic BioSystems Automatado Montage 360™.

Dilución del anticuerpo primario Los BioSystems de Diagnostic listos para usar anticuerpos se han optimizado para su uso con el sistema de detección de BioSystems de Diagnostic recomendado y no requieren más dilución. Una adición de dilución puede provocar la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar dicho cambio.

Los anticuerpos concentrados de Diagnostic BioSystems deben diluirse de acuerdo con el procedimiento de tinción cuando se utilizan con el sistema de detección de Diagnostic BioSystems recomendado. El uso de cualquier método de detección que no sea los kit/sistemas y protocolos recomendados requiere validación por el usuario. Las diluciones de anticuerpos deben ajustarse y verificarse adecuadamente de acuerdo con el tallo y el sistema de detección utilizados.

Materiales requeridos pero no proporcionados Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHC no se proporcionan. Los reactivos de pretratamiento, los sistemas de detección, los reactivos de control y otros reactivos auxiliares están disponibles con Diagnostic BioSystems. Consulte el sitio web de Diagnostic BioSystems en www.dbiosys.com

Almacenamiento y manipulación Conservar a 2-8ºC. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la expiración de la temperatura cuando se almacena a 2-8ºC. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas de las especificadas aquí, deben ser verificados para el usuario. Las porciones no utilizadas de la preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día.

La presencia de precipitado o olor inusual indica que el anticuerpo se está deteriorando y no debe utilizarse.

Los controles positivos y negativos deben ejecutarse simultáneamente con todas las muestras de los pacientes. Si se observa una tinción inesperada que no puede explicarse por las variaciones en los procedimientos de laboratorio y se sospecha un problema con el anticuerpo, póngase en contacto con el Soporte Técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2 o techsupport@dbiosys.com.

Colección y preparación de especímenes Los tejidos fijados en formalina al 10% son adecuados para su uso antes de la inclusión en parafina. Consultar referencias (Kiernan, 1981; Sheehan & Hrapchak, 1980) para más detalles sobre la preparación de muestras.

Se aconseja al usuario validar el uso de los productos con sus muestras de tejido preparado y manipularlas de acuerdo con sus prácticas de laboratorio.

Precauciones Este anticuerpo contiene menos de 0.1% de azida sódica. Las concentraciones de menos de 0.1% no son materiales peligrosos notificables según U.S. 29 CFR 1910.1200, OSHA Hazard Communication y CE Directiva 91/155/CEE. El azida sódica (NaN3) utilizado como conservante es tóxico si se ingiere. El azida sódica puede reaccionar con algunos metales pesados como el plomo y el cobre para formar azidas metálicas altamente explosivas. Tras la eliminación, enjuague con grandes cantidades de agua para evitar la acumulación de azida en las cañerías. (Centro para el Control de Enfermedades, 1976, Instituto Nacional de Seguridad y Salud Ocupacional, 1976). Los tejidos, antes y después de la fijación y todos los materiales expuestos a ellos, deben ser manejados como si fueran capaces de transmitir infecciones y desechar con las precauciones adecuadas. Nunca pipetear reactivos con la boca y evitar el contacto con la piel y las membranas mucosas con los reactivos y muestras. Si los reactivos o muestras entran en contacto con áreas sensibles, lave con grandes cantidades de agua. La contaminación microbiana de los reactivos puede resultar en tinción no específica. Los tiempos de incubación o temperaturas diferentes a las especificadas pueden provocar resultados erróneos. El usuario debe validar cualquier cambio. El MSDS está disponible bajo petición.

Tratamiento de los tejidos antes de la tinción Coloque las diapositivas en la solución de recuperación de antígenos recomendada mediante Diagnostic BioSystems Montage Opus™ Antigen Retrieval System. Deje que las diapositivas se enfríen durante 20 minutos antes de la tinción.

Procedimiento de tinción Consulte la siguiente tabla para conocer las condiciones recomendadas específicamente para este anticuerpo. Consulte el Sistema de detección automática de BioSystems PolyVue™ Plus—Sistema de detección de dos pasos o Montage PolyVue™ Plus™ Sistema de detección automática fo orientación sobre protocolos de tinción específicos u otros requisitos.

Parámetro

• Control positivo: Amígdala
• Dilución concentrada: 1:15-1:30
• Pretratamiento: EDTA Buffer pH 8.0
• Tiempo de incubación y temperatura: 60 min a RT
• Sistema de detección: PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos y PolyVue™ Plus™ Sistema de Detección Automática o Sistema Montage 360
• Tipo de tejido: FFPE

Control de calidad Consulte las Normas de Calidad de CLSI para el Diseño e Implementación de Ensayos de Inmuno-histoquímica; Orientación aprobada-Segunda edición (LA28-A2) CLSI Wayne, PA USA (www.clsi.org). 2011.

Solución de problemas Póngase en contacto con el soporte técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2, techsupport@dbiosys.com o su distribuidor local para informar de manchas inusuales.

Localización celular Membrana celular.

Limitaciones del procedimiento La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica métodos de detección histológicos e inmunológicos. El procesamiento y manejo de tejidos antes de la inmuno-tinción también pueden causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación e inclusión de la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad endógena de la peroxidasa o la actividad pseudoperoxidasa en los eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción no específica dependiendo del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen antígeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa de rábano picante (Omata et al, 1980). La contramarcha y el montaje inadecuados pueden comprometer la interpretación de los resultados.

Características de presentación La dilución óptima de anticuerpos y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: fijación, método de recuperación de calor, tiempos de incubación, y espesor de sección de tejido y el kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de los productos Diagnostic BioSystems, los tiempos y los títulos de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los títulos de la hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que se pueden utilizar para la interpretación de los resultados morfológicos junto con otras pruebas diagnósticas y datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.

Referencias

1. Call 54: 65, 1988.
2. Nature 312: 763, 1984.
3. Gay et al. Naturelaza 328: 626, 1987.
4. Adv Cancer Res 42: 67, 1984.