Anticuerpo monoclonal de ratón CD44/HCAM

Formatos disponibles:

• Mob256: Anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos.
• PDM172: Anticuerpo listo para usar para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos.
• PDM172-10MM: Anticuerpo listo para usar para su uso con Diagnostic BioSystems Montage PolyVue Plus™ Sistema de Detección Automática y Montage™ Sistema 360.

Uso previsto: Para uso diagnóstico in vitro. Este producto está destinado a la inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejido normal y neoplásico fijadas, incrustadas en parafina, para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de los estudios histológicos con los controles adecuados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizados por una(s) persona(s) cualificada(s) al evaluar e interpretar los resultados.

Resumen y explicación: Este anticuerpo es específico de una glicoproteína de la superficie celular de 80-95 kDa, conocida como CD44. CD44 se expresa en la superficie de los linfocitos, monocitos y granulocitos. La inmunotinción con CD44 se utiliza comúnmente para la discriminación del carcinoma de células de transición urotelial in situ de los cambios no neoplásicos en el urotelio.

Formato: Este producto se suministra como una inmunoglobulina purificada y contiene azida sódica como conservante.

Principios de los Procedimientos: La detección de antígenos por inmunohistoquímica (IHC) es un proceso de dos pasos que implica primero, la unión de un anticuerpo primario al antígeno de interés y, segundo lugar, la detección de anticuerpos anclados por un cromógeno. El anticuerpo primario se puede utilizar en IHC utilizando técnicas manuales o utilizando el Sistema de Tinción Automática de Montage 360™ de BioSystems.

Dilución del anticuerpo primario: Los BioSystems de Diagnóstico listos para usar anticuerpos se han optimizado para su uso con el sistema de detección de BioSystems de diagnóstico recomendado y no requieren más dilución. Una dilución adicional puede provocar la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar dicho cambio.

Materiales requeridos pero no proporcionados: Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHC no se proporcionan. Los reactivos de pretratamiento, los sistemas de detección, los reactivos de control y otros reactivos auxiliares están disponibles en Diagnostic BioSystems. Consulte el sitio web de Diagnostic BioSystems en www.dbiosys.com.

Almacenamiento y manipulación: Conservar a 2-8ºC. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8 ºC. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas de las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben utilizarse con prontitud. Las porciones no utilizadas de la preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día.

Precauciones: Este anticuerpo contiene menos de 0,1% de azida sódica. Las concentraciones inferiores al 0,1% no son materiales peligrosos reportables según U.S. 29 CFR 1910.1200, OSHA Hazard Communication y CE Directiva 91/155/CE. El azida sódica (NaN3) utilizado como conservante es tóxico si se ingiere. El azida sódica puede reaccionar con tuberías de plomo y cobre para formar azidas metálicas altamente explosivas. Al desechar, enjuague con grandes volúmenes de agua para evitar la acumulación de azida en la plomería.

Procedimiento de tinción: Consulte la siguiente tabla para conocer las condiciones recomendadas específicamente para este anticuerpo. Consulte el sistema de detección automática Detección automatica De biostistemas PolyVue™ Plus—Sistema de detección de dos pasos o Sistema de detección de montaje PolyVue Plus™ para obtener más instrucciones sobre protocolos de tinción específicos u otros requisitos.

Parámetro	Recomendaciones de BioSystems de Diagnóstico
Control positivo	Tonsil, Tumor de vejiga
Dilución del concentrado	1:50–1:100
El pretratamiento	Citrato Buffer pH 6.0
Tiempo de incubación y temperatura	30 min a RT
Sistema de detección	PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos o Sistema de Detección Automática para el Sistema Montage 360
Tipo de tejido	FFPE

Control de calidad: Consulte las Normas de Calidad de CLSI para el Diseño e Implementación de Ensayos de Inmuno-histoquímica; Orientación aprobada-Segunda edición (I/LA28-A2) CLSI Wayne, PA USA (www.clsi.org). 2011.

Localización celular: Membrana celular

Limitaciones del procedimiento: La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica métodos de detección histológicos e inmunológicos. El procesamiento y manejo de tejidos antes de la inmuno-histoquímica también pueden causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y la incrustación o de la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad de la peroxidasa endógena o actividad pseudoperoxidasa en los eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción no específica en función del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen superficie de hepatitis B antígeno (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa de rábano picante (Omata et al, 1980). La contramarcha y el montaje inadecuados pueden comprometer la interpretación de los resultados.

Características del rendimiento: La dilución óptima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: fijación, método de recuperación de calor, los tiempos de incubación, y el espesor de sección de tejido y el kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos únicos, los tiempos y los títulos de listados de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los protocolos de la hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que se pueden utilizar para la interpretación de los resultados morfológicos en conjunto con otras pruebas de diagnóstico y los datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.

Referencias:

1. Puerta KC et. Lancet, 1985 8 jun 8, 1(8441):1302-5.
2. Michie SA et. American Journal of Clinical Pathology, 1987, 88(4):457-62.

El anticuerpo CD44/HCAM de Diagnostic BioSystems es una herramienta valiosa en el diagnóstico de diversas patologías a través de la inmunohistoquímica, destacando por su especificidad y eficacia en la identificación de marcadores celulares. Es fundamental seguir rigurosamente los protocolos recomendados para asegurar la precisión y confiabilidad de los resultados obtenidos en el laboratorio.